метод применяется в медицине, биологии, ветеринарии, криминалистике, санитарной службе и других отраслях деятельности человека. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой и хронической стадии, так и задолго до того. Выявить циркулирующие в крови и внедрившиеся в слизистые органов дыхания коронавирусы можно 2 методами: полимеразной цепной реакцией (ПРЦ) и иммуноферментным анализом (ИФА). Количественные анализы ПЦР с обратной транскрипцией, как правило, используют при определении вирусной нагрузки ВИЧ и ВГС (количества этих вирусов, присутствующих в крови пациента). — первый русскоязычный информационно-аналитический портал о молекулярной диагностике и смежных областях науки и практики. |.
12 методов в картинках: полимеразная цепная реакция
ПЦР крови на сегодняшний день является одним из лучших диагностических инструментов в практике врача гинеколога, инфекциониста и других медицинских специалистов. Анализ крови полимеразно-цепной реакцией - распространенный, хороший способ исследования хронических, острых инфекционных болезней. Широко используемые в практике ИФА методы имеют определенную трудность в плане своевременной диагностики инфекции, так как они определяют возбудителя по наличию антител в организме.
До процедуры не курить. Также следует предупредить доктора о принимаемых лекарственных препаратах, возможных проблемах со здоровьем, хронических заболеваниях. Забор крови выполняется из вены. После окончания процедуры место прокола медсестра заклеивает стерильным пластырем, предупреждает о необходимости согнуть руку и держать ее в таком положении 10—15 минут. В противном случае высока вероятность появления болезненной гематомы. Сколько по времени делается исследование?
Сколько делается анализ, зависит от лаборатории. Средний срок выполнения колеблется в пределах 1—3 дней. Некоторые клиники предоставляют платную услугу быстрой постановки ПЦР, однако время проведения ограничивается возможностями медицинской аппаратуры. В поликлинике результаты могут передаваться врачу в течение 7—10 дней. Это связывают с большим наплывом пациентов. При этом биологический материал хранится в соответствии со всеми требованиями. Расшифровка результатов Как правило, расшифровка качественной ПЦР не представляет сложности. Но во избежание ошибочной трактовки, с полученным из лаборатории бланком следует обратиться к врачу.
Варианты, что означает та или иная разновидность ПЦР, приведены в таблице. Вид исследования Возможный результат и предполагаемая расшифровка Качественная ПЦР Отрицательный: человек здоров либо концентрация вирусной РНК в крови слишком мала для детекции. Положительный: человек инфицирован Проводится, если обнаружено РНК вируса качественным методом исследования. В зависимости от того, какие результаты анализов получены, определяется уровень вирусной нагрузки Генотипирование Проводится при гепатите С, подтвержденном другими методами исследования. Анализ позволяет установить точный генотип возбудителя патологии Но нередко возникает ситуация, когда ИФА на гепатит С положительный, а ПЦР отрицательный. Расшифровать такие результаты анализов может только врач. Однако подобные данные возможны в следующих случаях: беременность; перенесенный в острой форме гепатит С; пройденный курс лечения от HCV; наличие инфекций, повышающих вероятность ложноположительного результата ИФА. Только полимеразная цепная реакция показывает точное наличие вирусной инфекции в организме.
Но врачу следует точно установить причину ложноположительного результата. Качественный анализ Анализ ПЦР качественный на гепатит С подтверждает присутствие возбудителя заболевания в крови. Если РНК вируса не обнаружена, человек здоров. Но при подозрении на инфицирование рекомендуют повторно пройти исследование. Положительный результат свидетельствует об инфицировании. Но этот анализ не позволяет дифференцировать хронический гепатит С от острого, и не может показать, насколько активен патологический процесс. Количественный тест Количественный анализ методом ПЦР проводится после подтверждения диагноза и его расшифровка важна для определения тактики лечения. В зависимости от концентрации частиц возбудителя гепатита С выделяют несколько степеней вирусной нагрузки: средняя, высокая и низкая.
Чем больше показатель, тем тяжелее протекает инфекция и сложнее терапия. В норме вирусная РНК отсутствует в крови.
Но как только мир понял, что ПЦР - это офигенно, сразу появились лабораторные приборы, которые этот процесс автоматизируют. Фактически это просто нагревательный блок, способный очень точно держать температуру в течение заданного времени и быстро его менять. Сейчас их на рынке пруд пруди, на любой вкус и цвет, чуть ли не кофе умеют готовить. Но как нам это все помогает при анализах на вирус?
Вот такой милаха прогонит ПЦР за полчасика Медицинское применение. Причем ее может быть изначально очень мало, но цепной характер реакции позволит нам ее приумножить. Но если изначально целевой ДНК в пробе нет, то и реакция не пройдет. Добавляем полимеразу и праймеры, которые сядут именно и только на определенное место в ДНК какого-то интересующего нас патогена ДНК патогена ведь сильно отличается от нашей. Запускаем реакцию и смотрим, прошла она или нет! Если прошла - значит, пациент был заражен этим патогеном, а на нет и суда нет.
Получился очень точный, быстрый и относительно дешевый метод выявления патогенов - прикиньте, раньше пока анализ на какую-нибудь бактерию высеешь на питательную среду, дождешься, чтобы оно подросло, определишь, что выросло - несколько дней пройдет. А тут готовый результат за пару часов! Осталось только подобрать такие праймеры, чтобы они садились "отжигались" действительно только на ДНК патогена, а не на человеческую ДНК. Этот трудоемкий процесс и называется созданием тест-системы - наверняка слышали такое словосочетание в новостях! Этим занимаются, как правило, крупные компании, вкладывающие в этот процесс большие деньги и время. Но тут что хорошо - один раз подобрал такие праймеры - и все, дальше любой лаборант с минимальным опытом сможет провести сам анализ.
Дальнейшее развитие ПЦР пошло по пути ответа на вопрос "прошла реакция или нет? Логичным ответом на него стала ПЦР в реальном времени англ. Ну что ж, надеюсь, мне удалось приподнять завесу непонятного и слегка просветить любопытных! Это мой первый пост на Пикабу, не кидайте помидоры :- Картинки честно стырены с вики и гугла.
Это приводит к высокой вероятности неправильной постановки диагноза и ложноотрицательного результата тестирования. Также используется альтернативный подход, основанный на ПЦР, который имеет ряд преимуществ: возможность мультиплексного анализа в одной пробе тестировать сразу несколько патогенов , более высокую чувствительность и специфичность. В отличие от существующего ПЦР-анализа, в новом тесте можно выявить до 9 групп возбудителей с использованием только одного флуорометрического канала. Всего было проанализировано 425 образцов крови потенциально инфицированных пациентов из штата Висконсин.
Почему ПЦР-тесты не выявляют COVID-19: на какой день заболевания коронавирусом надо делать тест
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – наиболее информативный, точный и современный метод диагностики инфекционных заболеваний, позволяющий обнаружить возбудителя в организме пациента, даже если количество вредоносных клеток исчисляется единицами. ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Анализ крови ПЦР – это один из самых точных способов выявления в организме некоторых патогенных вирусов.
Исследование крови методом ПЦР
Анализ ПЦР на гепатит С – это молекулярно-генетическая диагностика, позволяющая как подтвердить или опровергнуть диагноз (при качественном ПЦР-анализе), так и определить динамику концентрации вируса в крови (при количественном анализе). Полимеразная цепная реакция – эффективный метод выявления скрытых инфекций, наследственных и онкологических патологий на ранних стадиях и при малом количестве генетического материала для исследования. Помимо обследования до начала терапии, анализ на ПЦР РНК ВГС необходим для суждения об исходах лечения. Во-первых, важно отметить, что анализ крови на антитела может выступать как альтернатива ПЦР при попытках выявить вирус на раннем этапе. Сдача анализа крови на ПЦР в гинекологии и урологии применяется при первичной диагностике и контроля за ходом лечения некоторых инфекционных заболеваний. В случае с коронавирусом кровь для ПЦР не берут – в начале заболевания вируса там может и не оказаться.
Анализ ПЦР на гепатит C
Количественный ПЦР-анализ позволяет оценить инфекционную нагрузку на организм, а также используется для анализа изменений экспрессии генов в опухолях. Важна также и высокая скорость проведения исследования. В отличие от традиционного посева при выявлении бактериальных инфекций, который занимает несколько дней, ПЦР тест обычно выполняется в течение суток. Это значительно увеличивает вероятность назначения своевременного лечения. Кроме того, с помощью ПЦР можно определить латентных носителей инфекции. Необходимо строго соблюдать правила сбора биоматериала и его хранения. Важно выбрать правильное время взятия биоматериала и выполнить правила подготовки к тесту. В частности, это касается и нового коронавируса, который присутствует в выделениях носоглотки и ротоглотки только в течение определенного времени, по истечении которого анализ окажется отрицательным. Кроме того, высокая чувствительность ПЦР может иногда превращаться из преимущества в недостаток. Показания к проведению ПЦР-анализа ПЦР-тесты используются для: диагностики инфекционных заболеваний, вызванных вирусами, бактериями и грибами, в том числе для определения возбудителей ряда урогенитальных инфекций; определения патологических генетических нарушений; определения роста и развития раковых клеток. ПЦР тест также можно использовать для прямой диагностики наличия заболевания и мутаций в развивающемся эмбрионе.
Например, впервые ПЦР была использована таким образом для диагностики серповидно-клеточной анемии путем обнаружения мутации одного гена.
В основу положена возможность значительно увеличивать малые концентрации определенных фрагментов ДНК. Для исследования потребуется небольшое количество биоматериала, например крови, слюны или мазок из половых органов. Анализ проводят в искусственных условиях in vitro. ДНК содержит генетическую информацию любого живого организма. Молекула состоит из двух цепочек, сплетающихся в единую спираль. Их последовательность уникальна для каждого организма, как отпечаток пальца или скан сетчатки глаза. Поскольку для каждого возбудителя зарегистрированы типичные укороченные последовательности нуклеотидов, то они хранятся в лабораториях в виде праймеров. Их в свою очередь присоединяют к ДНК возбудителя в пробе, и они многократно воспроизводят свои дубли под действием катализаторов.
Многократное увеличение происходит до тех пор, пока участок не станет доступным для определения и только при наличии в биоматериале ДНК патогена. Преимущества ПЦР-диагностики Заслуженная популярность метода заключается в простом исполнении, показателях чувствительности и специфичности. Описать ПЦР-анализ можно всего тремя словами — точность, надежность, скорость. При анализе выделяют фрагмент ДНК, присущий конкретному возбудителю.
Если же встреча с вирусом происходит во взрослом состоянии вирус Эпштейна-Барр является причиной инфекционного мононуклеоза, который у большинства заболевших сопровождается интоксикацией, лихорадкой, значительным увеличением лимфоузлов, увеличением небных и глоточных миндалин, увеличения печени, селезенки и появлением петехий на слизистой оболочки верхнего неба. При снижении иммунитета например, ВИЧ возможна реактивация вируса Эпштейна-Барр, что может вызывать инфекционный мононуклеоз наиболее часто , лимфопролиферативные заболевания лимфома Беркитта , назофарингеальную карциному. Цена услуги:.
Выделяют шесть генотипов и несколько субтипов HCV, которые определяют как особенности болезни и прогнозы для пациента, так и подбор лекарственных средств.
Анализ высоко чувствителен и специфичен и считается «золотым стандартом» диагностики заражения и финального контроля эффективности терапии. Так, результат лечения альфа-интерфероном оценивают через 24 недели по окончании курса по наличию или отсутствию РНК HCV в крови. В результатах исследования указывается, есть ли вирус в организме или нет при отсутствии инфицирования или при выздоровлении. Пройдите онлайн-тест, чтобы узнать есть ли у вас аллергия Количественный анализ: когда он нужен?
В России появился новый вид ПЦР-теста
Что такое ПЦР, как работает метод ПЦР в диагностике, преимущества методики, показания, подготовка к проведению ПЦР-анализа, как проводится ПЦР-анализ, что показывают результата теста. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — современный метод диагностики ряда заболеваний, основанный на выявлении молекул ДНК и РНК возбудителя в крови и других биологических жидкостях. анализ крови ПЦР помогает при генотипировании, например для обнаружения индивидуальной генетически заложенной реакции на определенный лекарственный препарат.
COVID-19: Общий анализ крови VS ПЦР-теста
Затем проводятся специальные реакции, включающие циклы нагревания, охлаждения и репликации ДНК или РНК, чтобы амплифицировать и обнаружить конкретные генетические последовательности, связанные с искомыми инфекциями или состояниями. ПЦР-анализ мочи может быть использован для обнаружения различных микроорганизмов, таких как бактерии, вирусы или паразиты, а также для идентификации конкретных генетических мутаций или маркеров, связанных с определенными заболеваниями. Этот метод обладает высокой чувствительностью и специфичностью, что делает его полезным инструментом в диагностике и мониторинге различных состояний, особенно в области инфекционной медицины и урологии. В отличие от обычной ПЦР, где результаты обнаруживаются после завершения реакции, анализ в реальном времени позволяет наблюдать и количественно измерять аккумуляцию амплифицированной ДНК или РНК на протяжении каждого цикла амплификации. Принцип работы анализа в реальном времени основан на использовании специальных флуоресцентных молекул, называемых пробами или примесями пробы , которые маркируют амплифицированный генетический материал. Эти пробы содержат специфические флуоресцентные метки, которые выделяют свет во время ПЦР-реакции, и детекторы, которые регистрируют этот свет. В реальном времени амплификация генетического материала сопровождается увеличением интенсивности флуоресценции, которая коррелирует с количеством начального генетического материала в образце. По мере того, как реакция прогрессирует, количество амплифицированного материала становится достаточным для обнаружения света, и ПЦР-аппарат регистрирует его в режиме реального времени. Измерение света сопровождается построением кривой амплификации, которая отражает изменения количества амплифицированного материала в течение циклов.
ПЦР в реальном времени является мощным инструментом для количественной оценки генетического материала и может использоваться в различных областях, таких как исследования генных выражений, генетика, микробиология, медицинская диагностика и др.
Код: 5 Mycoplasma genitalium полуколичественный метод Микоплазма гениталиум Срок исполнения: 1-2 360 р Описание: Микоплазмоз Метод качественного определения ДНК Mycoplasma genitalium методом ПЦР Подготовка к анализу: Перед взятием соскоба из уретры пациенту рекомендуется не мочиться в течение 1,5-2 ч. Код: 6 Ureaplasma urealyticum species spp качественный метод Уреаплазма уреалитикум виды Срок исполнения: 1-2 Внимание! Для данного анализа акционные предложения и скидки не действуют 250 р Описание: Уреаплазмоз Метод качественного определения ДНК Ureaplasma urealyticum методом ПЦР Подготовка к анализу: Перед взятием соскоба из уретры пациенту рекомендуется не мочиться в течение 1,5-2 ч. Код: 7 Ureaplasma urealyticum species spp полуколичественный метод Уреаплазма уреалитикум виды Срок исполнения: 1-2 570 р Описание: Микоплазмоз Метод качественного определения ДНК Mycoplasma genitalium методом ПЦР Подготовка к анализу: Перед взятием соскоба из уретры пациенту рекомендуется не мочиться в течение 1,5-2 ч. Код: 8 Биовары U.
Когда нужно делать анализ методом ПЦР и точно ли он покажет инфекцию? Данное лабораторное исследование на COVID-19 рекомендуется проходить всем лицам с признаками острых респираторных инфекций и тем, кто находится в группе риска. Полимеразная цепная реакция, как метод выявления нового коронавируса SARS-CoV-2 по фрагментам его генома в клиническом материале, является очень высокоточным методом. Это говорит о том, что погрешность есть, но она крайне мала и при использовании данного теста с точностью можно диагностировать коронавирус. Как готовиться к сдаче теста методом ПЦР приходить натощак или нет? Сколько по времени его делают долго или результат теста на ковид делается сразу? Если отсутствуют симптомы или, когда уже переболел, надо делать тест? И что это исследование значит на коронавирус надо сдать кровь или мазок? Из нашей статьи вы узнаете о том, откуда берётся клинический материал, как проводится исследование и влияют ли правила подготовки и прочие требования на его точность. Что такое ПЦР анализ на коронавирус и что он показывает? Что такое метод полимеразной цепной реакции? Что он показывает и как выглядит? Если проводится анализ ПЦР на ковид, это означает, что при проведении особого лабораторного теста пробы биоматериала пациента подвергаются молекулярной диагностике, позволяющей выявить коронавирус. В процессе исследования будет проведена обработка проб химическим реагентом, что вызовет выделение фрагментов генетического материала возбудителя вируса SARS-CoV-2. Чтобы чужеродные нуклеиновые кислоты стали заметны для лабораторного оборудования их количество увеличивают посредством амплификации ферментом полимеразой и воздействия слабых электрических токов. После этого по наличию или отсутствию светящихся полосок оранжевого цвета будут определять контагиозность «заразность» обследуемого пациента. Кроме того, определив этиологию заболевания врач верно подберёт терапевтичекую тактику и подходы к лечению пациента.
Доказано, что у женщин онкогенные штаммы этого вируса способны вызывать рак шейки матки. Существует целый ряд инфекций, способных поражать плод еще в материнской утробе. Среди них вирусы герпеса, токсоплазмы, краснухи. ПЦР-диагностика позволяет правильно определить тактику ведения и риски внутриутробной инфекции. Респираторные заболевания. Диагностика методом ПЦР стала в 2020 году актуальной как никогда и продемонстрировала свою незаменимость и эффективность. ПЦР-анализ — главный тест и «золотой стандарт» диагностики коронавирусной инфекции Sars-Cov-2 COVID-19 , ставшей причиной самой масштабной пандемии последних десятилетий. Наследственные заболевания и отцовство также диагностируются при помощи метода ПЦР. ПЦР-тесты применяются везде, где нужен быстрый, точный и надежный результат. Подготовка к проведению ПЦР-теста Еще одно немаловажное преимущество ПЦР-анализов — это отсутствие специфической подготовки к проведению тестов. Достаточно следовать стандартным рекомендациям специалиста: Анализ сдается утром натощак. При этом ряд генетических исследований проводится в произвольное время, удобное пациенту. При сдаче анализа по мазку из ротоглотки необходимо выдержать интервал с приемом пищи и воды в 3-4 часа перед тестом. Перед анализом на венерические инфекции необходимо воздержаться от половой активности в течение суток. Перед анализом нельзя использовать никакие противовирусные препараты. Подробную инструкцию по правилам подготовки к каждому анализу вы всегда можете получить у лечащего врача или у консультантов на нашей горячей линии. Как проводится ПЦР-анализ С 1983 года, когда был изобретен данный метод, прошло много времени, и технологии не стоят на месте.
ПЦР диагностика: что это такое
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — высокоточный метод диагностики заболеваний, основанный на копировании ДНК или РНК патогена в пробе. анализ крови ПЦР помогает при генотипировании, например для обнаружения индивидуальной генетически заложенной реакции на определенный лекарственный препарат. перед тем как сдать анализ крови на ПЦР, воздержитесь от утреннего приема пищи (анализ сдается натощак) и выпейте стакан чистой негазированной воды.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) диагностика: что это такое
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это метод молекулярно-генетической диагностики, позволяющий обнаружить в организме человека различные инфекционные заболевания. Для анализа крови методом ПЦР используется кровь, взятая из вены. Причем, в случае, когда полимеразная цепная реакция проводится на ранних стадиях заболевания, есть вероятность ложноотрицательного результата. Чтобы это сделать, мы разрабатываем ПЦР-тест, который будет «смотреть» конкретно этот вариант из всего генома, есть он у человека или нет. Если это наследственные раковые синдромы, которые мы ищем, то выделяем ДНК из крови. К тому же, такой способ, в том числе и анализ крови методом ПЦР обладает рядом плюсов в сравнении с другими возможными вариантами исследования. — первый русскоязычный информационно-аналитический портал о молекулярной диагностике и смежных областях науки и практики. |.