ПЦР тест на коронавирус – это анализ полимеразной цепной реакции (PCR), который проводится с помощью взятия мазка со слизистой рта и носоглотки и позволяет диагностировать даже бессимптомное течение болезни. Анализ — полимеразная цепная реакция имеет аббревиатуру — ПЦР. это крайне чувствительная вещь, то он не отличает живой вирус от мертвого. В свою очередь главврач клинико-диагностической лаборатории "Инвитро — Сибирь" Андрей Поздняков считает, что надолго сохраняющийся положительный ПЦР-тест может быть связан с особенностями дельта-варианта коронавируса.
Различие тестов на коронавирус
У нас исторически хорошие мощности по производству такого рода реагентов. Если в Москве мы обнаруживали положительный образец, должны были контрольную копию доставить в Новосибирск. Пока анализы доставлялись туда, потом обратно, проходило как раз несколько суток. На сегодня отправка второго образца анализа из клиники идет для повторного подтверждения не в Новосибирск, а в московский региональный центр. На это уходит 1,5-2 дня. Но смею вас заверить, сегодня все тесты уже относятся к разряду высокочувствительных. В течение этих трех дней человек должен быть изолирован. Если оба раза тест будет выдавать отрицательный результат, то в этом случае диагноз COVID-19 не ставится. После него не назначают повторный анализ? То есть, любой житель города может заказать диагностику и ему на дом привезут все необходимое. Брать мазок из горла должен врач или обученный лаборант.
Если пациент сам не туда попадет, у него может быть ложно-отрицательный ответ.
RU По правилам выписать с больничного после перенесенной коронавирусной инфекции могут, только если отсутствие вируса в организме подтвердит ПЦР-тест. Однако не всегда он приходит отрицательным сразу — есть случаи, когда у человека долгое время держится положительный тест на коронавирус, даже если саму болезнь удалось перенести в легкой форме.
Соответственно, я тоже ее подхватила. Но он уже спустя неделю получил отрицательный тест, — рассказывает пациентка Людмила. Приходит врач каждую неделю, и уже четыре раза положительный тест.
Сначала было весело и задорно, так как я работаю онлайн и не беру больничный. Но спустя месяц откровенно заявляю: это больше не смешно и невозможно» По ее словам, симптомы давно прошли — еще в августе, лечение закончилось тогда же.
Возбудители многих инфекций имеют несколько штаммов, поэтому точная диагностика гарантирует и эффективность лечения. Анализ проверен временем, тщательно апробирован клинически, поэтому его часто назначают в качестве дополнительного обследования, чтобы выявить определенный тип вируса или микроба. Кроме медицины метод нашел применение в генетике, криминалистике, археологии.
ПЦР-диагностика играет ведущую роль в выявлении неврологических и урологических заболеваний. Использование передовых технологий позволяет: определить причины острых уретритов — берут соскоб клеток из мочеиспускательного каналы у мужчины или женщины, влагалища, цервикального канала; диагностировать циститы, особенно хронические — через мочу или соскоб из шейки мочевого пузыря; тщательно обследовать простатит — берется секрет простаты; определить воспалительные заболевания головки полового члена и крайней плоти — соскоб клеток высыпаний; диагностировать ряд кожных патологий. В гинекологии ПЦР-анализы — обязательная диагностическая процедура, входящая в профиль обследований различных женских патологий. В первую очередь это диагностика широкого спектра заболеваний, передающихся половым путем. Врач может назначить анализ при подозрении на хламидиоз, гонорею, герпес, вирусы папилломы человека.
В качестве биоматериала обычно выступают кровь, моча или вагинальный соскоб. Метод ПЦР — наиболее точный способ выявления Covid-19. Его преимущество в том, что он обнаруживает сам вирус. Подтвердить патогенного агента удастся даже при бессимптомном течении заболевания.
Диагностика методом ПЦР стала в 2020 году актуальной как никогда и продемонстрировала свою незаменимость и эффективность. ПЦР-анализ — главный тест и «золотой стандарт» диагностики коронавирусной инфекции Sars-Cov-2 COVID-19 , ставшей причиной самой масштабной пандемии последних десятилетий. Наследственные заболевания и отцовство также диагностируются при помощи метода ПЦР. ПЦР-тесты применяются везде, где нужен быстрый, точный и надежный результат. Подготовка к проведению ПЦР-теста Еще одно немаловажное преимущество ПЦР-анализов — это отсутствие специфической подготовки к проведению тестов. Достаточно следовать стандартным рекомендациям специалиста: Анализ сдается утром натощак. При этом ряд генетических исследований проводится в произвольное время, удобное пациенту. При сдаче анализа по мазку из ротоглотки необходимо выдержать интервал с приемом пищи и воды в 3-4 часа перед тестом. Перед анализом на венерические инфекции необходимо воздержаться от половой активности в течение суток. Перед анализом нельзя использовать никакие противовирусные препараты. Подробную инструкцию по правилам подготовки к каждому анализу вы всегда можете получить у лечащего врача или у консультантов на нашей горячей линии. Как проводится ПЦР-анализ С 1983 года, когда был изобретен данный метод, прошло много времени, и технологии не стоят на месте. Сегодня существует несколько различных методик для проведения ПЦР-теста: С обратной транскрипцией. Самый распространенный способ идентификации известной последовательности РНК, включающий амплификацию, определение патогена и его идентификации среди образцов, хранящихся в научной картотеке. Вложенная ПЦР или «гнездовая» — используется для снижения количества неспецифичных продуктов реакции и имеет две стадии с использованием двух видов праймеров. Изотермические методы — не требуют повторяющихся температурных циклов, менее энергозатратны. Инвертированная ПЦР — применяется, если имеется только короткий фрагмент известной последовательности, но необходимо определить соседние последовательности после вставки ДНК в геном.
Анализ ПЦР
Наталья Пшеничная также рассказала, что в этом случае делать членам семьи такого человека, которые уже выздоровели. Вероятно потому, что количество вируса, которое может какое-то время сохраняться, у таких пациентов недостаточно для передачи его другим людям». Тем не менее, отметила Пшеничная, членам семьи рекомендуется соблюдать все неспецифические меры предосторожности — для того, чтобы исключить риск оказаться на какое-то время носителем SARS-CoV2. Следовательно, переболевшие члены семьи такого человека от него не заразятся, добавила эксперт. События на видео.
Вирусоноситель в этом случае должен оставаться на карантине, об этом рассказала Татьяна Руженцова, д. Габричевского Роспотребнадзора «Положительный результат ПЦР-тестирования в абсолютном большинстве случаев говорит о наличии вируса на слизистой оболочке носоглотки и возможности его передачи окружающим, — говорит Татьяна Руженцова.
Читать материал В некоторых случаях тест можно оказаться положительным при наличии не целого жизнеспособного вируса, а его частичек, добавляет эксперт. Однако обломки возбудителя могут существовать на слизистых оболочках непродолжительное время и удаляются при глотании, отсмаркивании или полоскании. В таких случаях результат следующего теста обычно уже отрицательный.
Он отметил, что в РФ вакцинация обязательна только для определенной категории граждан, за отказ от прививки не предусмотрены административная или уголовная ответственность. В некоторых других странах, подчеркнул Медведев, дела обстоят иначе.
Но даже при бессимптомном течении их нужно лечить, поскольку они провоцируют возникновение тяжелых осложнений. Показанием к молекулярной диагностике методом ПЦР в урологии и гинекологии является: воспаление шейки матки, простаты, уретры, органов малого таза; бесплодие у мужчин и женщин; эректильные нарушения. Анализ на скрытые инфекции требуется после незащищенного полового акта с постоянным при наличии симптомов ЗППП или незнакомым партнером, на этапе подготовки к беременности , а также по окончанию лечения половых инфекций.
Вирусы, как ВПЧ или генитальный герпес не поддаются лечению. Бактериальные и грибковые инфекции излечимы. Чтобы обнаружить скрытое присутствие вируса герпеса в крови, необходимо сдать анализ на антитела IgG. Противопоказания Соскоб ПЦР не берут во время месячных. Альтернативой может стать анализ крови. Также исследование не проводят во время местной или общей антибактериальной терапии. Подготовка к ПЦР При взятии крови достаточно не употреблять утром пищу. Исследование проводится натощак.
О видах исследований на новую коронавирусную инфекцию COVID-19
Людмила говорит, что не смогла получить ответа от врача ни на вопрос о том, почему так происходит, ни на вопрос, как долго она будет считаться ковид-положительной. Такая же ситуация у другого пациента — Ивана. Симптомы болезни прошли в течение недели, после этого он сдал повторный тест, но тест показал, что он всё еще заразен. В окружении уже все выздоровели, однако он до сих пор не может вернуться к работе — тесты продолжают давать положительный результат. Врачи говорят, что к такому развитию событий может привести сочетание множества факторов, в том числе может говорить о проблемах с иммунитетом в целом. Мы можем каким-то образом облегчить симптомы заболевания коронавирусом, но выздоровление идет за счет сил самой иммунной системы человека, — считает иммунолог Владимир Болибок.
Иммунолог Николай Крючков считает, что продолжительное выявление коронавируса у уже, казалось бы, выздоровевшего человека может говорить о том, что организм не может эффективно подавить вирус — недостаточно синтезирует IgA в слизистых, позже реагирует специфический иммунитет.
Даже если нет никаких ковидных признаков, но был контакт с носителем coronavirus, не стоит медлить с обращением к врачу и сдачей анализов. Существует два вида лабораторной диагностики, которую можно проводить уже в первый день инфицирования. Общая Она включает в себя основные клинические исследования: ОАК. Кровь анализируется на лейкопению снижение числа лейкоцитов , лимфопению уменьшение количества лимфоцитов , тромбоцитопению недостаток тромбоцитов. Биохимический анализ крови. Такой метод позволяет оценить состояние внутренних органов, на которые влияет новая инфекция. Производится лабораторная диагностика печеночных ферментов электролитов, мочевины, билирубина, альбумина и глюкозы. Анализ этих показателей помогает определить, есть ли функциональные отклонения в организме, и правильно назначить лечение, учитывая выявленные нарушения. Эта диагностическая процедура призвана оценить уровень кислорода в крови.
Плюс метода в том, что цельность кожного покрова не нарушается. Замер происходит с помощью прибора пульсоксиметра. Анализ уровня CRP. Этот маркер наличия коронавирусной инфекции показывает количество С-реактивного белка в организме.
Что означает ПЦР положительный анализ? Если при проведении метода полимеразной цепной реакции выявляется ДНК искомого организма, такой анализ ЦПР является положительным.
Данный результат показывает, что в организме в текущее время присутствует возбудитель. Хоть эти методы и направлены на одни и те же цели, механизм действия у них отличается: ПЦР показывает наличие элементов ДНК или РНК возбудителя в биологическом материале. Для ПЦР чаще используется материал из предполагаемого очага инфекции. ИФА или анализ на антитела позволяет идентифицировать реакцию антиген-антитело. Иммуноферментный анализ используется для уточнения стадии заболевания. ИФА анализ крови на антитела показывает наличие иммуноглобулинов в крови.
Наличие антител определяется вне зависимости от места локализации очага инфекции Анализ крови на антитела поможет обнаружить в крови наличие: Иммуноглобулинов типа IgA Иммуноглобулинов типа IgG Иммуноглобулинов типа IgM Обнаружение в крови Иммуноглобулинов типа говорит об активном инфекционном процессе IgM.
Об устойчивости иммунной системы к вирусу говорит показатель IgG более 1,1. Возможен ли экспресс-анализ? Пройти диагностику на антитела можно и в домашних условиях. Брать ее можно как из пальца, так и из вены, хотя второй способ без медсестры реализовать сложно. Проходить экспресс-диагностику на антитела лучше натощак. В набор входит одноразовый ланцет для прокола кожи. Кровь помещается в лунку тестового устройства, где смешивается с буферной жидкостью. Индикаторная реакция происходит в течение 10-20 минут. В зависимости от окрашивания определенных зон, можно обнаружить наличие IgM, IgG или их отсутствие.
Какой метод диагностики лучше? Формулировать вопрос таким образом не совсем корректно. Речь идет о двух методах с разными задачами. Тест на коронавирус, проводимый через полимеразную цепную реакцию, позволяет определить, болеет обследуемый или нет. Сравнивать его можно только с анализом крови и экспресс-наборами. Картина по итогам полноценного теста более достоверна. Обследование на антитела параллельно может подсказать, нет ли инфекции в организме на данный момент. Однако в первые дни такой метод неэффективен. Иммунный ответ формируется не сразу, поэтому ошибочный вывод об отсутствии вируса не связан с несовершенством анализа. На это требуется до 14 дней, потом по наличию IgA можно судить о состоянии больного.
Коронавирусная инфекция малоизученна — нельзя предсказать, как она будет протекать в конкретном случае. К тому же, антитела формируются не навсегда и вакцинацию не заменяют. Во избежание случайного заражения важно: носить средства индивидуальной защиты в общественных местах; пользоваться санитайзером; укреплять иммунитет; обращаться к врачу при первых признаках респираторного заболевания. Эффективным методом профилактики вирусных заболеваний является вакцинация. Она в России добровольная — обязать делать прививку не может никто.
Мясников рассказал, почему при положительном ПЦР-тесте человек не болен COVID
ПЦР (метод полимеразной цепной реакции) — экспериментальный метод, использующийся при лабораторной диагностике многих инфекционных заболеваний и позволяющий обнаружить большинство микроорганизмов. полимеразная цепная реакция. У вас положительный результат теста на COVID-19. ПЦР или полимеразная цепная реакция является золотым стандартом в диагностике многих инфекций. Сделав антигенный экспресс-тест, а иногда не один, и получив положительный результат, многие пытаются подтвердить диагноз в лаборатории с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). ПЦР – это тест, позволяющий определить или исключить наличие конкретной инфекции у пациента, то есть исследование представляет собой этиологическую диагностику патогенного возбудителя.
Суть полимеразной реакции
- Анализы на ПЦР и инфекции воле Москва-сити
- Различие тестов на коронавирус
- Статьи по теме
- ПЦР - что это такое простыми словами, преимущества ПЦР анализов
- Что такое ПЦР тест на коронавирус и как правильно сдавать мазок
- Чем отличается ПЦР-тест на COVID и анализ на антитела - медицинский центр Бэби Плюс в Одинцово
ПЦР диагностика - анализ на инфекции (+ видео)
Если его результат положительный, то этот результат верный. «Если экспресс-тест показал положительный результат, а ПЦР-тест — отрицательный, такое может быть, потому что вирусы не сидят и не ждут. Результат оценивается либо положительно, когда бактерия или вирус выявляются в исследуемом образце, либо отрицательно, что означает отсутствие инфекции в организме. Точность метода. это крайне чувствительная вещь, то он не отличает живой вирус от мертвого.
Как определить коронавирус или что такое анализ ПЦР?
Антитела к коронавирусу появляются в среднем через 8-12 дней от начала симптомов. Первые IgM выявляются раньше, и через 4-6 дней после их появления начинают снижаться и исчезают. Поэтому их наличие говорит о том, что вы переносите острую фазу болезни. Напомню: сразу после наступления симптомов IgM не определяются, они появятся в середине болезни и будут сопровождать ее до выздоровления. А вот вторая разновидность антител - IgG - появляются несколько позже антител "острой фазы". Они достигают максимума, потом начинают снижаться, но до конца так и не исчезают. Их наличие говорит о том, что вы уже перенесли болезнь и возможно имеете иммунитет против нее про иммунитет я осторожничаю, так как полных данных у нас пока нет ", - подчеркивает врач. Бывают тесты, добавляет Мясников, на антитела "качественные" - просто определяют факт наличия того или иного антитела быстрые тест-полоски, как при определении беременности, например и "количественные"- определяющие именно концентрацию антител, что намного информативнее например считается, что защитная "иммунная" концентрация антител IgG начинается от 10. Проблема еще и в том, что в фазе восстановления концентрация антител IgM могут оставаться повышенной довольно долго.
Такой результат свидетельствует о перенесенном в прошлом инфекционном процессе.
При этом возбудителя в организме уже нет, а антитела являются защитным фактором в случае возможного повторного заражения в будущем. После перенесенной инфекционной патологии в крови длительное время циркулируют антитела класса IgG, а антитела острого инфекционного процесса класса IgM отсутствуют. С помощью такой комбинации исследований есть возможность: A. Данная комбинация исследований также позволяет определить давность инфицирования микроорганизмом ПЦР: повторный анализ Как только пациентом будет пройден назначенный курс приема медикаментов — необходимо отправиться на повторный ПЦР анализ. Контрольный анализ позволит понять: Правильно ли подобрали антибиотик некоторые инфекции чувствительны к антибиотикам Вылечен ли пациент Если контрольный ПЦР анализ отрицательный — пациент здоров. ПЦР: повторный анализ положительный Важно! С целью контроля лечения не применяют обычный или качественный ПЦР. Это связано с тем, что частички микроорганизмов, уже безопасные, продолжают циркулировать в крови больного. Именно поэтому, повторный анализ ПЦР может быть положительным.
Когда нужно проследить результат, врач назначает количественный ПЦР. Такой анализ покажет, насколько эффективным было лечение. Повторный анализ ПЦР может быть положительным, если пациент не соблюдал рекомендации врача: Закончил прием антибиотиков раньше срока Не принимал все препараты, прописанные врачом Сдача анализов выполнена раньше, чем через месяц после пропития антибиотиков Врач подобрал неэффективный курс лечения Когда повторный ПЦР анализ на наличие инфекций положительный — назначается новое лечение. Прописываются другие антибиотики, возможно совмещение нескольких антибиотиков. Венеролог или гинеколог порекомендует вам медицинское учреждение, где можно сдать анализы методом ПЦР. При ПЦР редко получаются ложные результаты. Выбрать можно любой платный центр, где предлагается сдать анализы методом ПЦР. Самое важное в полученном результате — правильная расшифровка. На основании результатов, врач назначает лечение, а его эффективность зависит от правильной диагностики заболевания.
Выбирая платную клинику, почитайте отзывы о квалификации врачей, которые там работают.
АльфаМед расскажет Вам, что означают те или иные показатели и поможет разобраться! ПЦР-тест необходимо сдавать для установления факта заболевания коронавирусом. Этот вариант диагностики позволяет обнаружить вирус на его начальной стадии, даже если у пациента еще нет признаков и симптомов болезни. Антитела, в свою очередь, это ответная реакция организма на коронавирус. Результат теста на антитела IgG и IgM позволяет понять, на какой именно фазе заболевания находится пациент, а также помогает определить, была ли перенесена инфекция в прошлом.
Если Вы хотите максимально точно определить болеете ли Вы, на какой стадии заболевания находитесь или же понять, было ли заболевание в прошлом, то лучшим вариантом будет сдача не только ПЦР-теста, но и теста на антитела. В совокупности, результаты этих тестов дадут самый четкий и информативный результат.
Ещё одно достоинство метода — он обнаруживает даже мизерное количество вирусов и бактерий и, соответственно, распознаёт болезнь, когда видимых клинических проявлений ещё нет. Благодаря этому лечение начинается на первичной стадии, задолго до того как появляются разного рода осложнения.
ПЦР более объективен, чем многие другие иммунологические способы диагностики, поскольку практически не даёт ложно-положительных ложно-отрицательные значительно более редки ввиду высокой чувствительности метода. Следует учитывать, что точность и достоверность диагностики методом ПЦР зависит от возможностей лаборатории, квалификации врачей, качества забора материала и от соблюдения правил подготовки к сдаче анализа.
Анализ ПЦР на гепатит C
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – молекулярно-генетический анализ. Ученые из Италии проверили, может ли появиться жизнеспособный вирус в дыхательных путях людей, выздоровевших от COVID-19 и потом снова получивших положительный результат ПЦР-теста. У подавляющего большинства таких пациентов, скорее всего, нет вируса. ПЦР (полимеразная цепная реакция) – достижение молекулярной биологии, одна из главных методик клинической лабораторной диагностики конца 20-го и начала 21-го веков, приносящая огромную пользу в различных областях медицинской науки.
ПЦР-диагностика
Обычно перед первым циклом проводят длительный прогрев реакционной смеси в течение 2—5 минут для полной денатурации матрицы и праймеров. Отжиг править Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом. Температура отжига зависит от состава праймеров и обычно выбирается на 5 градусов меньше, чем температура плавления праймеров. Неправильный выбор температуры отжига приводит либо к плохому связыванию праймеров с матрицей при завышенной температуре , либо к связыванию в неверном месте и появлению неспецифических продуктов при заниженной температуре. Время стадии отжига — 30 секунд [ источник не указан 800 дней ], одновременно, за это время полимераза уже успевает синтезировать несколько сотен нуклеотидов. Элонгация править ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации.
Температура элонгации зависит от полимеразы. Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований. После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 7—10 минут.
Что он показывает и как выглядит? Если проводится анализ ПЦР на ковид, это означает, что при проведении особого лабораторного теста пробы биоматериала пациента подвергаются молекулярной диагностике, позволяющей выявить коронавирус. В процессе исследования будет проведена обработка проб химическим реагентом, что вызовет выделение фрагментов генетического материала возбудителя вируса SARS-CoV-2.
Чтобы чужеродные нуклеиновые кислоты стали заметны для лабораторного оборудования их количество увеличивают посредством амплификации ферментом полимеразой и воздействия слабых электрических токов. После этого по наличию или отсутствию светящихся полосок оранжевого цвета будут определять контагиозность «заразность» обследуемого пациента. Кроме того, определив этиологию заболевания врач верно подберёт терапевтичекую тактику и подходы к лечению пациента. Метод ПЦР на коронавирус: как делается забор биоматериала? Основным видом биологического материала является отделяемое зева и носа. Поэтому сдаётся на анализ мазок из ротоглотки или носоглотки, но чаще всего делают оба мазка. Процедура забора образцов слизистой, которую требует ПЦР тест на коронавирус, может быть неприятной, но важно, что она не занимает более нескольких десятков секунд, а её результат показывает заражён человек в действительности или нет. А как берут мазок?
Отбор проб для анализа на коронавирус осуществляется при помощи сухого стерильного одноразового зонд-тампона с синтетическим волокном. Лёгким движением по наружной стенке полости носа его вводят на глубину 2-3 см и слегка опускают вниз. Удаляют зонд вращательными движениями. Мазок из ротоглотки берётся вторым зондом с задней стенки глотки, поверхности миндалин и нёбных дужек. Концы зондов отламывают и помещают в пробирку с раствором для последующей транспортировки в лабораторию для большей концентрации возбудителя ковид-19 используется одна пробирка. До проведения теста образцы биоматериала считают потенциально инфекционными.
Он хотел создать метод, благодаря которому можно было бы амплифицировать ДНК увеличивать число её копий в ходе многократных последовательных удвоений исходной молекулы ДНК с помощью фермента ДНК-полимеразы. Это событие стало поистине революционным и оказало в последующем серьёзное влияние на развитие молекулярной биологии, генетики и медицины. Подтверждение этому - Нобелевская премия в области химии, которой был удостоен К. Муллис в 1993 году. Помимо медицины метод нашёл применение в генетике, криминалистике, археологии.
Этот процесс называется денатурацией и проходит при температуре 93 - 95 градусов Цельсия. Уже через 30 - 40 секунд связи нуклеотидов разрываются и вместо двойной цепи получаются две одиночные. Надо заметить, что если после этого, снова, просто понизить температуру, то разделившиеся половинки достаточно быстро находят друг друга и всё возвращается, практически, к исходному состоянию. Следовательно, нам надо не дать соединиться половинкам интересующей нас ДНК. Как этому помешать? Тогда, место на половинке-основании окажется занято, при попытке присоединения, свойство комплементарности окажется нарушено, и вторая половинка не сможет прицепиться на своё "законное" место. Это "что-то" названное праймером, синтезируется в научной или промышленной лаборатории и представляет собой цепочку синтетических нуклеотидов олигонуклеотидов , расположенных в таком же порядке, как и у того вируса бактерии и так далее , на который делается анализ. Например, если делают анализ на хламидии, то праймер соответствует специфическому участку гена, кодирующего главный белок наружной мембраны МОМР Chlamydia trachomatis. Итак, вторая стадия - присоединение праймеров к ДНК также называется отжигом длится от 20 до 60 секунд. Температура отжига равна 50 - 65 градусам для каждого вида возбудителей, то есть для каждого праймера, она своя. На этом этапе мы уже разделили ДНК на две половинки и не даём им соединиться. Теперь самое время достроить каждую половинку до полноценной ДНК. Но температура, при которой это должно произойти, очень высока, по меркам молекулярной биологии — более 70 градусов выше температуры отжига. Проблема была решена благодаря открытию уникального фермента taq-ДНК-полимеразы, содержащегося у бактерий, обитающих в гейзерах. Особенность этого фермента заключается в его исключительной термостойкости период полужизни при 95 градусах составляет 40 минут и высокой рабочей температуре — оптимум работы 72градуса. В клетках, фермент ДНК-полимеразы отвечает за копирование и "ремонт" ДНК и способен удлинять короткие нуклеотидные цепочки праймеров, последовательно присоединяя к одному из концов праймера дополнительные нуклеотиды, таким образом, достраивая цепь до конца. Так ДНК копирует саму себя. Третий этап - достраивание цепей ДНК. Комплементарное достраивание цепей ДНК происходит от конца к концу цепи в противоположных направлениях, начиная с участков присоединения праймеров. Материалом для синтеза новых цепей ДНК служат добавляемые в раствор "кирпичики" - все те же производные аденина, гуанина, цитозина и тимина. Процесс синтеза катализируется ферментом термостабильной ДНК-полимеразой Taq-полимеразой и проходит при температуре 70 - 72 градуса. Время протекания синтеза зависит от длины достраиваемого фрагмента и обычно принимается равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований. Теперь мы имеем две двойные цепочки ДНК вместо одной, исходной. Ну а дальше процесс повторяется.