Ученые из Италии проверили, может ли появиться жизнеспособный вирус в дыхательных путях людей, выздоровевших от COVID-19 и потом снова получивших положительный результат ПЦР-теста. У подавляющего большинства таких пациентов, скорее всего, нет вируса.
Диагностика инфекций методом ПЦР: что это такое?
диагностика гепатитов. Результат ПЦР-диагностики может быть либо положительным, либо отрицательным. Положительный результат говорит о том, что в организме человека обнаружены следы инфекции, причем именно в данный момент времени. ПЦР тест на коронавирус – это анализ полимеразной цепной реакции (PCR), который проводится с помощью взятия мазка со слизистой рта и носоглотки и позволяет диагностировать даже бессимптомное течение болезни. Чаще всего ПЦР-тест показывает ложноположительный результат из-за наличия в носу или ротоглотке фрагментов уже погибшего вируса, рассказал в интервью Лайфу доктор медицинских наук, практикующий врач, профессор Антон Ершов.
Что делать при положительном тесте на коронавирус
| ПЦР ДИАГНОСТИКА. Что это такое? | диагностика гепатитов. |
| Что такое ПЦР тест на коронавирус и как правильно сдавать мазок | О частоте ложно-положительных результатов диагностического теста можно судить по показателю, который называется специфичность. |
| Может ли ПЦР-тест на COVID-19 показать положительный результат при простуде | По его мнению, у многих пациентов положительный тест ПЦР сохраняется на месяцы, при этом люди не являются ни больными, ни заразными. |
| О видах исследований на новую коронавирусную инфекцию COVID-19 | На ранних стадиях болезни получить положительный результат значительно выше. «После четвертого-пятого дня болезни вероятность обнаружить вирус в носоглотке снижается, а респираторные симптомы могут быть в это время в самом разгаре. |
| ПЦР на гепатит C: расшифровка количественного и качественного анализа, норма | На ранних стадиях болезни получить положительный результат значительно выше. «После четвертого-пятого дня болезни вероятность обнаружить вирус в носоглотке снижается, а респираторные симптомы могут быть в это время в самом разгаре. |
Что такое анализ ПЦР?
Перечень анализов, проводимых при помощи ПЦР-диагностики расширяется с каждым днём. Что это за метод, как его проводят и в чём его достоинства? На эти и другие вопросы отвечает Владислав Александрович Чередниченко, врач-инфекционист, заместитель директора по развитию «Клиника Эксперт» Воронеж. Севиля Ибраимова 13 ноября 2019 Перечень анализов, проводимых при помощи ПЦР-диагностики расширяется с каждым днём. ПЦР или, иначе, полимеразная цепная реакция — это современный высокоинформативный метод молекулярно-генетической диагностики, активно применяемый для выявления у человека различных инфекционных и наследственных заболеваний.
Расшифровка этих анализов зависит от их результатов, которые могут быть следующими: ПЦР положительный на фоне роста активности антител IgM. Указывает на активный инфекционный процесс, вызванный выявленным возбудителем. Анализ ПЦР положительный с отсутствием антител к возбудителю. Указывает на совсем недавнее инфицирование обычно менее 3-4 недель , при котором организм человека еще не выработал иммунный ответ. ПЦР отрицательный, антитела — положительные. Такой результат свидетельствует о перенесенном в прошлом инфекционном процессе. При этом возбудителя в организме уже нет, а антитела являются защитным фактором в случае возможного повторного заражения в будущем. После перенесенной инфекционной патологии в крови длительное время циркулируют антитела класса IgG, а антитела острого инфекционного процесса класса IgM отсутствуют. С помощью такой комбинации исследований есть возможность: A.
Данная комбинация исследований также позволяет определить давность инфицирования микроорганизмом ПЦР: повторный анализ Как только пациентом будет пройден назначенный курс приема медикаментов — необходимо отправиться на повторный ПЦР анализ. Контрольный анализ позволит понять: Правильно ли подобрали антибиотик некоторые инфекции чувствительны к антибиотикам Вылечен ли пациент Если контрольный ПЦР анализ отрицательный — пациент здоров. ПЦР: повторный анализ положительный Важно! С целью контроля лечения не применяют обычный или качественный ПЦР. Это связано с тем, что частички микроорганизмов, уже безопасные, продолжают циркулировать в крови больного. Именно поэтому, повторный анализ ПЦР может быть положительным. Когда нужно проследить результат, врач назначает количественный ПЦР. Такой анализ покажет, насколько эффективным было лечение. Повторный анализ ПЦР может быть положительным, если пациент не соблюдал рекомендации врача: Закончил прием антибиотиков раньше срока Не принимал все препараты, прописанные врачом Сдача анализов выполнена раньше, чем через месяц после пропития антибиотиков Врач подобрал неэффективный курс лечения Когда повторный ПЦР анализ на наличие инфекций положительный — назначается новое лечение.
Прописываются другие антибиотики, возможно совмещение нескольких антибиотиков. Венеролог или гинеколог порекомендует вам медицинское учреждение, где можно сдать анализы методом ПЦР.
Расшифровка результатов ПЦР исследований проводится в тот же день, когда получены результаты или в момент обращения к врачу. Время получения данных анализа составляет от нескольких часов до трех суток в зависимости от лаборатории. Идеальным можно считать вариант, когда от момента первичного обращения к врачу до интерпретации проб проходит не более суток в клиниках, оснащенных современными лабораториями. Однако и она не исключает ложноположительных или ложно отрицательных ответов.
В основном это связано с погрешностями при заборе лабораторного материала. Нельзя утверждать, что кровь может быть универсальным материалом для установки диагноза. В идеале должна забираться биологическая проба из предполагаемого места воспаления. Так, для половых инфекций более актуальным будет исследование соскоба эпителия урогенитального тракта. Ошибки могут скрываться и на этапе обработки исследуемого материала и быть технической погрешностью работы персонала. Таким образом, все достоинства метода нуклеарного поиска инфекции способны раскрыться при использовании качественных реактивов и аппаратуры высоко квалифицированным персоналом.
На это уходит 1,5-2 дня. Но смею вас заверить, сегодня все тесты уже относятся к разряду высокочувствительных. В течение этих трех дней человек должен быть изолирован. Если оба раза тест будет выдавать отрицательный результат, то в этом случае диагноз COVID-19 не ставится. После него не назначают повторный анализ? То есть, любой житель города может заказать диагностику и ему на дом привезут все необходимое. Брать мазок из горла должен врач или обученный лаборант. Если пациент сам не туда попадет, у него может быть ложно-отрицательный ответ. Это альтернатива ПЦР? Анализ вирусных частиц можно произвести при помощи ИФА, но вряд ли его сегодня будут использовать.
Дело в том, что по точности и чувствительности он сильно уступает вышеописанному способу ПЦР. Вот они очень эффективны и дают результат через несколько минут.
О видах исследований на новую коронавирусную инфекцию COVID-19
Если его результат положительный, то этот результат верный. «Если экспресс-тест показал положительный результат, а ПЦР-тест — отрицательный, такое может быть, потому что вирусы не сидят и не ждут. Что делать, если пришел положительный результат анализа COVID-19. Полимеразная цепная реакция — метод, позволяющий обнаружить конкретный генетический материал в образце.
Что делать при положительном тесте на коронавирус
А поскольку они специфичны и строго индивидуальны для каждого микроорганизма или живого существа за счет уникальности последовательности нуклеотидов во фрагментах, ошибка в определении целевого ДНК или РНК исключена. Генетическая информация любого живого организма записывается в ДНК. Эта молекула состоит из двух цепочек, сплетающихся в единую спираль. Для каждого организма, включая вирусы, бактерии и грибки, последовательность нуклеотидов уникальна. Ее можно сравнить с отпечатком пальца или сканом сетчатки глаза человека. Укороченные последовательности нуклеотидов, характерные для каждого вида патогена возбудителя опасных заболеваний , хранятся в базах научных лабораторий в виде праймеров — отдельных участков ДНК, типичных для только конкретного возбудителя. Эти участки значительно короче любой молекулы ДНК. Такие праймеры присоединяются к ДНК возбудителя в пробе и под действием катализаторов многократно воспроизводят свои дубли. Этот процесс называются «репликация» — многократное увеличение, дублирование искомого участка до тех пор, пока он не станет доступен для определения. Процесс репликации возможен только при наличии в пробе ДНК возбудителя. Преимущества метода ПЦР Высокая специфичность.
Метод ПЦР определяет заданную последовательность нуклеотидов, присущую конкретному патогену. Исключен риск ложноположительных результатов. Для ПЦР достаточно всего несколько молекул ДНК патогена или даже уже неактивных — разрушенных вирусных частиц, сохранивших специфические участки ДНК в достаточном количестве , чтобы он был обнаружен в ходе исследования. Скорость проведения. Лаборатория получает результат ПЦР-теста через несколько часов, клиент — уже на следующий день. Скорость диагностики имеет принципиально важное значение для своевременного лечения.
Положительный повторный тест на коронавирус Что делать человеку, если после выздоровления повторный тест на коронавирус оказался положительным? Можно ли в таком случае ходить на работу, учебу. Врачи утверждают, что после выздоровления от COVID-19 взятые у пациента образцы для ПЦР-анализа могут давать положительный результат в течение нескольких недель. Поэтому для прекращения карантинных мероприятий выздоровевшему пациенту нет необходимости проходить повторное тестирование.
Несмотря на то, что при положительном повторном результате пациент считается выздоровевшим и не опасным для окружения, принимать решение о возвращении к привычной жизни должен семейный врач, основываясь на клиническую картину. Что делать работодателю Если работник, переболевший коронавирусной инфекцией, предоставил справку от врача о том, что он полностью здоров, работодатель не имеет права заставлять проходить повторное тестирование на COVID-19. Между тем, на рабочих местах необходимо предпринять меры профилактики коронавируса. Таких работников необходимо сразу направить домой для получения медицинской помощи. Оптимальное расстояние — 1,5 метра. Дезинфицирующими растворами протирать дверные ручки, включатели, поручни, места общественного пользования. Наиболее уязвимой категорией людей, которые часто переносят коронавирусную инфекцию с осложнениями, являются работники пожилого возраста. Чтобы обезопасить их от инфицирования, работодатель должен составить график отпусков или пересмотреть рабочий день, чтобы минимизировать контакты с потенциальными носителями COVID-19. Многопрофильный медицинский центр экспертного уровня Меню.
В особой зоне риска находятся те, кто работает вне дома. Проблема в том, что после заражения может пройти неделя, прежде чем возникнут первые симптомы, и все это время вы будете распространителем вируса. Поэтому-то и необходимо проходить тестирование, которое поможет вовремя обнаружить болезнь и принять меры, чтобы не заразить окружающих. Таким образом можно сдержать распространение пандемии. В лицензированных частных клиниках вы можете пройти 2 вида тестирования — так называемый ПЦР-тест и тест на антитела. Но какой из них лучше выбрать и какой точнее? Рассмотрим особенности каждого из них, чтобы найти ответ. Анализ проводят по биоматериалу, взятому из носа или зева пациента. Сюда клетки вируса попадают первым делом, поэтому тест будет эффективен с первых дней.
Мазок берут в клинике, но само лабораторное исследование проводится в Государственном научном центре дерматовенерологии. Для проверки на вирус используется тест-система от этого же Государственного научного центра дерматовенерологии. Результаты анализа можно получить через 3 дня.
На этой молекуле аки на дискете закодированы все белки, которые клетка способна производить, а также еще много чего, регулирующего работу клетки. Но если компы используют двоичный код, представляя информацию в виде кучи 0 и 1, то в ДНК информация закодирована последовательностью 4 букв - нуклеотидов. Эти 4 буквы - A, T, G и С - обозначают химические вещества аденин, гуанин, цитозин и тимин. Эти вещества тупо стоят длинной цепочкой, крепко сшитые химическими связями. Прикол в том, что ДНК состоит из двух таких цепочек, причем вторая является зеркальной копией первой это называется умным термином "обратная комплементарность".
Как так вышло? Дело в том, что помимо сильных связей с соседями по цепи, нуклеотиды умеют образовывать еще и относительно слабые водородные связи, причем А и Т всегда будут иметь две связи, а G и С - три. Таким образом, напротив А в одной цепи всегда будет стоять Т в другой, и та же фигня с G и С. Легко понять, что такие цепи, по сути, несут одну и ту же информацию. А так как двойная спираль ДНК значительно более устойчива к воздействию извне, то в ходе эволюции на заре истории Земли цепи решили подружиться и жить вместе. Тем более, что такая дружба дала им одно очень важное преимущество. Репликация ДНК. Рано или поздно клетке надо будет поделиться, обеспечив рост организма или размножение.
При этом всю эту хитро упакованную многометровую махину ДНК надо аккуратно скопипастить так, чтобы две дочерние клетки получили максимально точную копию оригинала. Вот тут-то и пригодилась двойная спираль - специальные белки в нужный момент расцепляют цепи, и на основании каждой цепи достраивается ее комплементарная копия. Отвечает за это фермент под названием полимераза. Она ползет по старой одиночной цепи ДНК и вставляет в новую цепь буквы, комплементарные старой. Видит А - вставляет Т, видит G - C, ну вы поняли. Чтобы полимераза могла сесть на одиночную цепь ДНК и начать свое дело, ей нужна затравка - это уже готовый маленький кусочек второй цепи, сидящий на первой. Его еще называют праймер.
Мясников рассказал, почему при положительном ПЦР-тесте человек не болен COVID
| Чем ПЦР отличается от антител и какой анализ россиянам нужно сдавать при подозрении на ковид? | Полимеразная цепная реакция — метод, позволяющий обнаружить конкретный генетический материал в образце. |
| Диагностика COVID-19: обзор основных методов | метод применяется в медицине, биологии, ветеринарии, криминалистике, санитарной службе и других отраслях деятельности человека. |
| ПЦР диагностика - анализ на инфекции (+ видео) | Сделав антигенный экспресс-тест, а иногда не один, и получив положительный результат, многие пытаются подтвердить диагноз в лаборатории с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). |
ПЦР-тестирование: как работает метод ПЦР в диагностике
Сколько действует результат анализа на коронавирус ПЦР? По результатам исследования пациент получит справку. Она может быть необходима для предоставления на учёбу, работу и пр. Срок годности результата анализа ПЦР на коронавирус зависит от целей получения справки, но в среднем это 2-4 дня. Более точную информацию необходимо уточнить по месту требования результата ПЦР исследования. Другие полезные статьи Как отличить настоящую санитарную книжку от поддельной? Личная медицинская санитарная книжка — официальный документ государственного образца, подтверждающий, что состояние здоровья работника соответствует его профессиональной сфере деятельности. Читать Какой анализ показывает онкологию?
Во многих случаях онкологические заболевания протекают на ранних стадиях практически бессимптомно. Поэтому большинство людей, имеющие онкологических заболевания, не обращаются вовремя к специалисту. О посещении врача они задумываются только после того, когда явно чувствуют ухудшение организма. Чтобы определить патологии, необходимо провести комплексное исследование, направленное на изучение биологических материалов человека - крови, кала и мочи. В случае обнаружения отклонений, онколог назначит индивидуальную диагностическую программу с целью развеять или подтвердить подозрения. Читать Половая жизнь во время месячных: почему стоит воздерживаться от близости? Вопрос о половой близости во время месячных обсуждаем во многих парах, чьи отношения давно обрели стабильность.
Сегодня активно попираются различные мифы и предубеждения, касающиеся женских "критических дней", идущие ещё со времён язычества. Звучат нарекания на пуританское воспитание прошлых лет и связанные с ним запреты на специфический секс.
В случае ПЦР биоматериал берут дважды, через нос и через рот, смешивают с физраствором и отправляют в лабораторию.
Все исследование занимает около трех часов, рассказывает технолог подразделения молекулярно-генетических исследований лаборатории Маргарита Абрамова. Если результат положительный — его повторяют, и только в случае двойного положительного результата пациенту сообщают о болезни.
Биологический материал для мужчин и женщин — кровь или мазок.
Для выявления микоплазмы целесообразнее брать мочу или соскоб. Но нужно учитывать, что точность уретрального или влагалищного мазка превосходит исследование мочи. Востребованным является ПЦР 6, в который входит хламидиоз , уреаплазмоз , микоплазмоз ДНК mycoplasma genitalium и mycoplasma hominis , гарднереллез , трихомониаз.
Показания Анализ ПЦР на ЗППП назначают для дифференциальной диагностики при появлении следующих симптомов: боль внизу живота, в том числе во время полового акта; специфические выделения из влагалища: желтые, серые, зеленые, гнойные, пенистые, водянистые, с неприятным запахом и т. ИППП могут протекать бессимптомно, особенно у мужчин. Но даже при бессимптомном течении их нужно лечить, поскольку они провоцируют возникновение тяжелых осложнений.
Показанием к молекулярной диагностике методом ПЦР в урологии и гинекологии является: воспаление шейки матки, простаты, уретры, органов малого таза; бесплодие у мужчин и женщин; эректильные нарушения. Анализ на скрытые инфекции требуется после незащищенного полового акта с постоянным при наличии симптомов ЗППП или незнакомым партнером, на этапе подготовки к беременности , а также по окончанию лечения половых инфекций. Вирусы, как ВПЧ или генитальный герпес не поддаются лечению.
Бактериальные и грибковые инфекции излечимы.
В 1983 году его открыл американский ученый Кэри Мюллис, за что впоследствии и получил Нобелевскую премию. Изначально метод использовался в основном для научных целей, но затем, разглядев перспективность и эффективность, его стали продвигать в практическую медицину. Что представляет собой ПЦР Анализ абсолютно специфичен. При правильном выполнении он не может дать ложноположительный результат, поэтому его используют для диагностики инфекционных и наследственных заболеваний, для установления отцовства, клонирования генов, введения мутаций, выделения новых генов. В основу положена возможность значительно увеличивать малые концентрации определенных фрагментов ДНК. Для исследования потребуется небольшое количество биоматериала, например крови, слюны или мазок из половых органов. Анализ проводят в искусственных условиях in vitro. ДНК содержит генетическую информацию любого живого организма.
Молекула состоит из двух цепочек, сплетающихся в единую спираль. Их последовательность уникальна для каждого организма, как отпечаток пальца или скан сетчатки глаза. Поскольку для каждого возбудителя зарегистрированы типичные укороченные последовательности нуклеотидов, то они хранятся в лабораториях в виде праймеров. Их в свою очередь присоединяют к ДНК возбудителя в пробе, и они многократно воспроизводят свои дубли под действием катализаторов.
Что такое ПЦР тест на коронавирус и как правильно сдавать мазок
Корейский центр по управлению и контролю за болезнями проанализировал данные пациентов, которые были госпитализированы с COVID-19, но впоследствии имели негативный результат ПЦР теста и были выписаны из стационара. Среди них 285 пациентов в последующем имели положительный результат теста при повторном тестировании. Однако ни одного из 790 проживающих с ними членов семьи или ближайших контактов инфицирования коронавирусом не выявлено. Это свидетельствует о том, что при обнаружении вирусной РНК на этой стадии люди перестают быть заразными. Поэтому Корейский центр по управлению и контролю за болезнями больше не требует изоляции в таких случаях.
В общей популяции пациенты у которых была коронавирусная инфекция в течение 10-14 дней, вероятно, больше не представляют опасность для окружающих.
Небольшое количество иммуноглобулинов свидетельствует о том, что вы переболели недавно. Какой тест сдавать? Оба варианта тестов являются эффективными, но в большинстве случаев мы рекомендуем делать тест на антитела, так как он более универсальный. Быстрее - Сейчас в лабораториях большие очереди по ПЦР-тестам и результатов можно ждать от 3 до 5 дней.
По антитела результаты будут готово в течение 3-х дней. Доступность - ПЦР-тест стоит дороже, так как тест-системы более дорогие. ПЦР-тест необходим для того, чтобы выявить инфекцию на ранней стадии, до развития иммунного ответа. Его рекомендуют делать в тех случаях, когда тест на антитела дал отрицательный или неоднозначный результат. Если вам трудно определиться с выбором и вы хотите получить полную картину, не теряя лишнее время, то сразу делайте 2 теста.
Это самый лучший вариант. Зачем проводить тест на коронавирус Коронавирус COVID-19 часто протекает незаметно, человек может не испытывать никаких симптомов, но при этом заражать окружающих. Неизвестно, как отреагирует организм другого зараженного, а ведь в некоторых случаях все заканчивается аппаратом искусственной вентиляции легких.
Мазки со слизистой оболочки носоглотки и ротоглотки собираются в одну пробирку для большей концентрации вируса при его наличии.
Пациенту за 3-4 часа до взятия мазка нельзя есть, пить, чистить зубы, полоскать рот и горло, использовать спрей-освежитель для ротовой полости, жевать жевательную резинку, курить. Кроме того, нельзя промывать нос, использовать спреи, капли, мази для носа. Это позволит сохранить для исследования максимально возможное число пораженных вирусом клеток эпителия наружного слоя верхних дыхательных путей. Интерпретация результатов «Обнаружено» — результат говорит о наличии РНК вируса в пробе биоматериала пациента, то есть человек инфицирован коронавирусом, заразен для окружающих.
В случае получения в лаборатории положительного теста результат выдается как «первично положительный», а биоматериал передается для проведения подтверждающего теста в референсный центр Роспотребнадзора. Результат первичного тестирования может быть как подтвержден, так и не подтвержден референсным центром. При получении первично-положительного результата пациенту необходимо соблюдать режим самоизоляции до получения результата подтверждающего теста. Формулировка «обнаружено» в результате подтверждающего теста означает, что исследование пробы пациента выполнено дважды, первично положительный результат подтвержден дополнительным исследованием в референсном центре.
При получении окончательного результата «обнаружено» заболевшему предписывается соблюдать режим самоизоляции и обратиться к врачу.
В связи с этим иммунолог поддержал решение Минздрава РФ, согласно которому граждане с 21 февраля смогут получить сертификат при наличии антител к коронавирусу. Ранее в четверг в федеральном оперативном штабе по борьбе с коронавирусом сообщили, что диагноз COVID-19 специалисты теперь смогут поставить по результатам экспресс-теста. Подтверждать его результат ПЦР-тестом больше не нужно.
В конце января правительство России в своем Telegram-канале сообщило, что результаты экспресс-тестов будут доступны на сайте госуслуг. В конце декабря прошлого года глава Роспотребнадзора Анна Попова на неформальной встрече руководителей государств — участников СНГ заявила , что Россия занимает лидирующие места по охвату тестирования на коронавирус.
Диагностика методом ПЦР: современный подход выявления инфекционных и генетических заболеваний
— Ложноположительный результат — это когда пациент не инфицирован коронавирусом, но лаборатория выдала положительный результат теста на SARS-CoV-2 методом ПЦР. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это метод молекулярно-генетической диагностики, позволяющий обнаружить в организме человека различные инфекционные заболевания. это метод исследования, позволяющий добиться высокой точности анализа. Что делать, если пришел положительный результат анализа COVID-19. Тест на полимеразную цепную реакцию (ПЦР) на COVID-19 – это молекулярный тест, который анализирует ваш образец верхних дыхательных путей в поисках генетического материала SARS-CoV-2.
Различие тестов на коронавирус
Севиля Ибраимова 13 ноября 2019 Перечень анализов, проводимых при помощи ПЦР-диагностики расширяется с каждым днём. ПЦР или, иначе, полимеразная цепная реакция — это современный высокоинформативный метод молекулярно-генетической диагностики, активно применяемый для выявления у человека различных инфекционных и наследственных заболеваний. Официальной датой изобретения этого метода диагностики считают 1983 год, а «родителем» - американского биохимика Кэри Муллиса. Он хотел создать метод, благодаря которому можно было бы амплифицировать ДНК увеличивать число её копий в ходе многократных последовательных удвоений исходной молекулы ДНК с помощью фермента ДНК-полимеразы. Это событие стало поистине революционным и оказало в последующем серьёзное влияние на развитие молекулярной биологии, генетики и медицины.
В этом методе используют флуоресцентно меченые ДНК-зонды для анализа накопления продукта реакции или интеркалирующий краситель SYBR Green или его аналоги. Sybr Green I [en] обеспечивает простой и экономичный вариант для детекции и количественного определения ПЦР-продуктов в ходе ПЦР в режиме реального времени без необходимости использования специфичных флуоресцентных зондов или праймеров. Кроме главного, в спектре красителя имеются два небольших дополнительных максимума поглощения — при 290 нм и 380 нм. Первые циклы проводят при температуре выше оптимальной температуры отжига, затем каждые несколько циклов температуру отжига постепенно снижают до оптимальной. Это делается для того, чтобы праймер гибридизовался с комплементарной цепью всей своей длиной; тогда как при оптимальной температуре отжига, праймер частично гибридизуется с комплементарной цепью. Частичная гибридизация праймера на геномной ДНК приводит к неспецифической амплификации, если участков связывания для праймера достаточно много. В точках, содержащих анализируемую ДНК, происходит амплификация с образованием молекулярных колоний. Вторая полимераза необходима для коррекции ошибок, внесённых первой, так как Taq-полимераза останавливает синтез ДНК, если был добавлен некомплементарный нуклеотид. Этот некомплементарный нуклеотид удаляет Pfu-полимераза. Смесь полимераз берётся в отношении 50:1 или даже меньше 100:1, где Taq-полимеразы берётся в 25—100 раз больше, чем Pfu-полимеразы. RAPD Random Amplification of Polymorphic DNA [en] , ПЦР со случайной амплификацией полиморфной ДНК — используется тогда, когда нужно различить близкие по генетической последовательности организмы, например, разные сорта культурных растений, породы собак или близкородственные микроорганизмы. В этом методе обычно используют один праймер небольшого размера около 10 п. Этот праймер будет частично комплементарен случайным участкам ДНК исследуемых организмов.
Исследование и его суть заключаются в создании определенных условий, при которых происходит цепная реакция РНК гепатита. Если при их сопоставлении с нуклеотидной последовательностью вируса гепатита C выявляются совпадения, это свидетельствует о том, что в крови имеются вирусные частицы, а в печени происходят процессы распада. Если количество вируса ниже определенного уровня, выносится отрицательный диагноз, если выше — положительный. Важно понимать, что в первом случае не исключается недавнее инфицирование или мощная противовирусная терапия, являющиеся факторами, снижающими концентрацию опасных частиц, и анализ ПЦР на гепатит не работает. Высокий же уровень содержания вируса в организме в большинстве случаев сигналит о том, что в печени вот-вот начнется инфекционный процесс. Не исключено, что заболевание находится в запущенном состоянии и понадобится серьезная терапия, вплоть до пересадки органа. Существует два вида исследования крови методом ПЦР при гепатите: количественный анализ и качественный анализ. Кроме того, он способен дать информацию об интенсивности, с которой развивается патология, и эффективности назначенного лечения. Количественный анализ на гепатит C крайне важен, поскольку фиксирует резистентность к действию противовирусных препаратов и позволяет скорректировать терапию. После того как больной пройдет курс лечения, ПЦР помогает определить дальнейший порядок назначений. В некоторых случаях выявляется необходимость дополнительных обследований. Если количественный анализ на ПЦР выявляет сильное воспаление и фиброз, больному прописывают курс лечения противовирусными препаратами.
Как правило лаборатории заявляют, что выполнят тест от 8 часов до 2-3 дней. Если некоторые лаборатории заявляют, что «Результат будет сегодня», а другие обещают это только через 3 дня, это связано не с продолжительностью собственно анализа, а с логистикой обработки биоматериала. Более-менее все они одинаковы по своей чувствительности и специфичности. Хотя самые первые тесты, рекомендованные к применению в феврале, отличались немного пониженной чувствительностью. Кроме того, есть и фактор «врача»: в одном случае у пациента могли взять побольше вируса и его система «увидела», в другом — в пробирку попало меньше вирусных частиц, и ответ был ложно-отрицательным. Он включает несколько этапов. Первый этап -высвобождение нуклеиновой кислоты из вируса занимает минут 30-40 , потом идет этап обратной транскрипции — превращение РНК в ДНК и ПЦР-амплификации 1,5 часа. Каждый набор реагентов, как правило, поставляется в комплекте для анализа 96-ти образцов. Поэтому цифры поставленных тест-систем иногда плавают: кто-то считает комплектами, кто-то единицами тестов. Более корректно считать в единицах. А сегодня нам сообщают, что Россия поставляет тест-системы в 30 стран мира. У нас действительно хватает тестов на всю страну?