ПЦР, бактериологические посевы. Поэтому определить, заразен ли человек при получении положительного результата ПЦР, не представляется возможным. Это касается не только ПЦР-теста на SARS-CoV-2, но и на другие инфекции.
Сколько можно болеть: почему даже спустя месяц ПЦР-тест на ковид остается положительным
Чувствительность ПЦР-анализа составляет 10-1000 клеток в исследуемом образце к примеру, чувствительность иммунологических и микроскопических тестов - всего 103-105 клеток. Методика позволяет выявлять несколько возбудителей из одной биологической пробы. Полное исследование проводится за 4-4,5 часа, реже — несколько дольше. Примером доклинической диагностики будет обследование в инкубационный период с момента заражения до возникновения жалоб больного , а также латентная инфекция когда симптомов нет совсем, а есть только лабораторные данные — ПЦР, к примеру. Одним из важных моментов ПЦР-диагностики является проведение ПЦР в архивном материале или биологических остатках, что важно для идентификации личности или отцовства. В настоящее время ПЦР-диагностика подвергается существенному развитию. Происходит совершенствование самого метода, вновь и вновь появляются новые разновидности ПЦР, на медицинский рынок поступают новые тест-системы для данной реакции. Благодаря этому стоимость ПЦР-исследований с каждым годом становится доступнее для широкого круга пациентов. В ходе исследования копируется только тот участок, который подходит под заданные условия, и только в ситуации присутствия его в исследуемой пробе.
Например, материал для исследования, в котором предполагается наличие фрагментов ДНК или РНК возбудителя слюна, кровь, моча, выделения из половых органов , помещается в специальный реактор амплификатор. Далее к нему добавляются специфические ферменты, которые связываются с ДНК или РНК патогена, и происходит синтез ее копии. Это копирование идет в несколько этапов по типу «цепной реакции», и в конечном итоге из одной копии генетического материала могут образоваться сотни и тысячи копий. Затем идет анализ и сравнение результата с имеющейся базой данных о строении различных возбудителей.
Таким образом, при простуде ПЦР-тест не может дать положительный результат на коронавирус. Хочешь получать главные новости на свой телефон?
Подпишись на наш Telegram-канал! Ваша реакция?
Этапы ПЦР-диагностики. Ложные результаты могут дать нарушения на любом из этапов исследования ПЦР-диагностика инфекций относится к категории «золотых стандартов» среди других лабораторных методов, поэтому ее можно применить для поиска возбудителей многих заболеваний, на первый взгляд не имеющих ничего общего между собой: Туберкулез различной локализации, пневмония в том числе и атипичная, вызванная хламидией ; Детские инфекции коревая краснуха, паротит, корь ; Дифтерия; Зоонозная инфекционная болезнь — листериоз заболевание характеризуется многообразием симптомов с поражением лимфоузлов, ЦНС, внутренних органов ; Заболевания, обусловленные проникновением вируса Эпштейн-Барра инфекционный мононуклеоз и др. Доказано, что хеликобактер становится причиной развития рака желудка или 12-перстной кишки; Кандидоз и практически все ЗППП.
ПЦР-диагностика инфекций, передающихся половым путем, имеет особую значимость, поскольку заболевания, вызванные таким образом, часто длительное время протекают без каких бы то ни было клинических проявлений, зато при беременности начинают активизироваться и, таким образом, угрожать здоровью и даже жизни ребенка. Некоторые из них «торч» относятся одновременно и к ИППП, поэтому последние требуют более подробного рассмотрения. Ознакомиться с самыми популярными методиками читатель сможет в следующих разделах статьи. Как правильно подготовиться, чтобы получить достоверный результат? Сразу заметим, что подготовка к ПЦР довольно простая, никаких особых усилий со стороны пациента не требующая.
Нужно лишь выполнить три несложных задания: Не иметь половых контактов за 24 часа до того, как сдать анализ; Для забора и анализа крови из вены нужно прийти на голодный желудок, пить, кстати, тоже нельзя; Сдать мочу следует ночную утром — в стерильную баночку, приобретенную накануне в аптеке. ПЦР может работать в любой биологической среде Метод ПЦР не отличается «кровожадностью», поэтому приемлет любую биологическую среду, содержащую предполагаемый инфекционный агент. Обычно выбор — что нужно взять для исследования, остается за врачом. Таким образом, в поисках возбудителя, кроме анализа крови хотя он тоже подходит и в большинстве случаях берется параллельно другому материалу , можно использовать: Мазок выделения урогенитального тракта ; Соскоб слизистых ротовой полости, конъюнктивы, носоглотки, половых путей у женщин берут из шейки матки и влагалища, у мужчин — из уретры ; Слюну;.
ИФА анализ крови на антитела показывает наличие иммуноглобулинов в крови. Наличие антител определяется вне зависимости от места локализации очага инфекции Анализ крови на антитела поможет обнаружить в крови наличие: Иммуноглобулинов типа IgA Иммуноглобулинов типа IgG Иммуноглобулинов типа IgM Обнаружение в крови Иммуноглобулинов типа говорит об активном инфекционном процессе IgM. Если заболевание протекает в активной стадии, пациенту требуется пройти лечение.
Если ПЦР отрицательный, а анализ на антитела положительный, что это значит? Подобное может произойти вследствие нескольких факторов: Остаточный или иммунологический след, который остается в результате выработки иммуноглобулина. Пациент перенес данное заболевание в прошлом, возможно бессимптомно и не является больным на момент обследования. В подобном случае необходима детализация анализов крови и консультация врача, ведь нужно разобраться, что именно дает положительную реакцию. Что делать, если пришел положительный ПЦР анализ? К сожалению, симптомы некоторых заболеваний не всегда видны, и в организме человека таятся скрытые инфекции.
Что такое анализ крови на ПЦР, и зачем он нужен
Тест на антиген выполняется в течение 4 часов, то есть результат можно получить день в день. Слабые стороны теста такие же, как у ПЦР: почистил зубы, покурил, поел и т. Поэтому необходимо соблюдать рекомендации сдачи анализа. Тут, помимо положительного и отрицательного результата, есть еще и сомнительный — это когда человек только заболевает и белок еще не выработался в нужных для определения объемах.
В таких случаях рекомендуется переделать анализ через 5 дней. Правила сдачи ИФА на ковид Подготовка к тесту на антиген будет следующей: За сутки отказаться от алкогольных напитков, даже пива и вина. За 12 часов — не пользоваться средствами антисептики и обезболивания для ротовой полости аэрозоли для орошения горла, рассасывающие таблетки, полоскания.
За 4 часа — не курить. За 2 часа — не чистить зубы и не пользоваться ополаскивателем для рта.
Поэтому их обнаружение говорит о текущей или недавно перенесенной инфекции. Длительность их сохранения в организме на сегодняшний день точно неизвестна.
Тестирование на антитела к вирусу SARS-Cov-2 рекомендуется использовать в следующих случаях: в качестве дополнительного метода диагностики острой инфекции не ранее 7-го дня болезни для IgM, не ранее 10-14-го дня болезни для IgG или при невозможности по какой-либо причине исследования мазков; для выявления лиц с бессимптомной формой инфекции; для установления факта перенесенной ранее инфекции при обследовании групп риска и проведении массового обследования населения для оценки уровня популяционного иммунитета; для отбора потенциальных доноров иммунокомпетентной антиковидной плазмы. Донорами антиковидной плазмы могут стать лица в возрасте от 18 до 55 лет, с отсутствием противопоказаний к донорству ряд хронических заболеваний, беременность , которые болели коронавирусной инфекцией и выздоровели, при условии, что с начала болезни прошло не менее 5 недель. Решение о том, может ли человек стать донором антиковидной плазмы, принимает врач. Отдельно стоит сказать об оценке степени иммунной защиты формировании иммунитета после вакцинации.
На сегодняшний день известно, что после перенесенной коронавирусной инфекции в организме могут формироваться антитела IgG к нескольким белкам коронавируса. Исследуемые после болезни IgG — это антитела к так называемому N-белку коронавируса исследуется в большинстве лабораторий. До 6 рабочих дней Доступно с выездом на дом 1 090 руб В корзину Этот анализ выявляет наличие или отсутствие антител. При повторном выполнении количественного анализа можно оценивать устойчивость иммунного ответа по динамике уровня этих антител.
В этом случае результат ПЦР будет ложноположительным. Однако, если инфекция еще активна и не «убита» антибактериальными и противовирусными средствами, то в организме будут персистировать «живые» патогенные микроорганизмы. В этом случае итог полимеразной цепной реакции будет положителен на конкретный вирус или бактерию.
Полное исследование проводится за 4-4,5 часа, реже — несколько дольше. Примером доклинической диагностики будет обследование в инкубационный период с момента заражения до возникновения жалоб больного , а также латентная инфекция когда симптомов нет совсем, а есть только лабораторные данные — ПЦР, к примеру. Одним из важных моментов ПЦР-диагностики является проведение ПЦР в архивном материале или биологических остатках, что важно для идентификации личности или отцовства. В настоящее время ПЦР-диагностика подвергается существенному развитию. Происходит совершенствование самого метода, вновь и вновь появляются новые разновидности ПЦР, на медицинский рынок поступают новые тест-системы для данной реакции.
Благодаря этому стоимость ПЦР-исследований с каждым годом становится доступнее для широкого круга пациентов. В ходе исследования копируется только тот участок, который подходит под заданные условия, и только в ситуации присутствия его в исследуемой пробе. Например, материал для исследования, в котором предполагается наличие фрагментов ДНК или РНК возбудителя слюна, кровь, моча, выделения из половых органов , помещается в специальный реактор амплификатор. Далее к нему добавляются специфические ферменты, которые связываются с ДНК или РНК патогена, и происходит синтез ее копии. Это копирование идет в несколько этапов по типу «цепной реакции», и в конечном итоге из одной копии генетического материала могут образоваться сотни и тысячи копий. Затем идет анализ и сравнение результата с имеющейся базой данных о строении различных возбудителей. Посредством ПЦР можно не только выявить тип возбудителя, но и выдать количественный результат анализа, то есть как много возбудителей в организме человека. Метод ПЦР в настоящее время расширяет круг возможностей проводимых исследований: введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК, и получил широкое распространение в медицине, к примеру, для установления отцовства, появление новых генов и прочее.
Когда назначается ПЦР-диагностика?
- Почему полимеразная реакция — цепная?
- Диагностика коронавируса COVID-19
- Что такое ПЦР-анализ?
- Анализ методом ПЦР. Что такое ПЦР-диагностика и для чего она используется
- ПЦР-тест и тест на антитела к коронавирусу: как разобраться в результатах?
Анализ ПЦР 12 инфекций
диагностика гепатитов. ПЦР или полимеразная цепная реакция является золотым стандартом в диагностике многих инфекций. У вас положительный результат теста на COVID-19. анализ ПЦР положительный Положительный анализ ПЦР (полимеразной цепной реакции) обозначает, что в изученном материале была обнаружена инфекция, которую искали. ПЦР (полимеразная цепная реакция) – это высокоточный метод молекулярно-генетический диагностики.
ПЦР диагностика - анализ на инфекции (+ видео)
Анализ крови — расшифровка у взрослых ПЦР Трактовка результатов этого исследования не представляет сложностей, потому что отсутствует таблица норм анализа крови на ПЦР. В бланке результатов могут фигурировать лишь две фразы: отрицательный результат — возбудитель, на который проводился анализ, не выявлен; положительный результат — в организме имеется возбудитель указанного заболевания. Следует знать, что ПЦР может быть положительной даже при отсутствии клинических симптомов заболевания! Расшифровка анализа крови на ПЦР у детей не отличается от таковой у взрослых. Кому нужно сдать анализ на ПЦР Любой человек может сдать кровь для исследования. Прямым показанием для исследования является подозрение на инфекции передающиеся половым путем хламидиоз , гарднереллез, ВИЧ-инфекция. При случайном незащищенный половом контакте только ПЦР поможет поставить диагноз на ранней стадии, если человек заразился каким-либо заболеванием. А также женщины, только планирующие беременность.
В этом случае итог полимеразной цепной реакции будет положителен на конкретный вирус или бактерию. Анализ может идентифицировать как определенный вирус например, вирус герпеса , так и его конкретный штамм например, 8 тип герпесвируса.
Узнать больше на эту тему:.
Однако для дальнейшего процесса необходимо большое количество таких микроучастков, что может обеспечить его размножение путем достраивания новых, идентичных найденному фрагменту, участков ДНК репликация. Размножение является естественным и неотъемлемым свойством нуклеиновой кислоты, которая будет реплицироваться с помощью фермента полимеразы даже вне живого организма в пробирке с пробой , образуя множество клонов, то есть, пойдет цепная реакция. Клонироваться будут все новые и новые фрагменты, но только те, в которых заинтересован исследователь. Вот почему так важно взять «чистый», без посторонних примесей анализ, а тест проводить очень аккуратно. Учитывая перечисленные способности полимеразной цепной реакции, можно догадаться, почему она так легко отличает уреаплазму от микоплазмы , или каждую из них от хламидии. Таким образом, даже если среди миллионов клеток человеческого организма затеряется не сам живой вирус, а лишь частица его ДНК, то ПЦР, если ей ничто не помешает, пожалуй, справится с задачей и сообщит о пребывании «чужака» положительным результатом.
В этом суть ПЦР и ее основное достоинство. Достоинства и недостатки К лаборатории, осуществляющей ПЦР-диагностику, предъявляются высочайшие требования в плане оборудования, тест-систем и квалификации медицинского персонала. Это высокотехнологичная лаборатория, располагающая арсеналом высокочувствительных и высокоспецифичных реагентов, поэтому особых недостатков она не имеет. Разве что выдает положительный результат при отсутствии клинических проявлений и тем самым ставит лечебника перед дилеммой: стоит начинать лечение или нет? Врач, наблюдающий пациента, начинает сомневаться в достоверности результатов тестирования, поскольку никаких признаков заболевания не видит. Но все же, учитывая высокую чувствительность ПЦР-системы, следует помнить, что она обнаруживает возбудителя даже в доклинической стадии, а положительный результат в таком случае является скорее достоинством, чем недостатком.
Правильная подготовка к сдаче материала не представляет особых сложностей. Существуют следующие рекомендации врачей для пациентов: 1 не жить половой жизнью за сутки до сдачи материала; 2 кровь для исследования сдается утром натощак не есть, не пить ; 3 при сдаче мочи собирается первая утренняя порция в чистый стерильный контейнер. Сроки готовности ПЦР-анализа Окончательный результат готов через 1,5-2х суток после сдачи материала. В некоторых случаях результат готов в первый же день. Расшифровка результатов ПЦР Отрицательный результат ПЦР указывает на то, что в исследуемом материале на момент его сдачи не обнаружено никаких следов инфекционных агентов. Большинство случаев показывает отсутствие инфекции, которую пытались найти в исследуемой пробе. Положительный результат ПЦР указывает на выявление следов инфекции в исследуемой биологической пробе. С большой точностью положительный результат указывает на наличие инфекции в данный момент времени. Существуют ситуации, когда ПЦР оказывается положительной, а об активной инфекции говорить нельзя — это так называемое «здоровое носительство» без клинических симптомов болезни, которое не требует лечения, но требует динамического наблюдения у врача. Наблюдается чаще при ряде вирусных инфекций ВПЧ, ЦМВИ, ВЭБ-инфекция, герпетическая инфекция и другие в таких материалах как слюна, соскоб цервикального канала, уретры, то есть из местного очага. Однако нельзя забывать, что передача инфекции от носителей здоровым людям возможна, как и возможен переход в хроническую форму болезни с активацией процесса. Если же ПЦР положительна в крови, то это уже не носительство и требует специфического лечения. Количественный результат ПЦР оценивается только врачом индивидуально для той или иной инфекции отдельно и не имеет общих градаций.
Что такое ПЦР-анализ?
Чем ПЦР отличается от антител и какой анализ россиянам нужно сдавать при подозрении на ковид? | Если у человека положительный ПЦР-тест, первое, что он должен сделать — это позвонить в свое лечебное учреждение. |
Мясников рассказал, почему при положительном ПЦР-тесте человек не болен COVID | Что такое ПЦР–тест. |
Ученый раскрыл правду о тестах на коронавирус: почему бывают ошибки - МК | ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Данная реакция обеспечивает многократное воспроизводство определённых участков ДНК. Сделать ПЦР-диагностику в Москве Вы можете в лаборатории АО «Семейный доктор». |
Анализ ПЦР 12 инфекций
Результат ПЦР-диагностики может быть либо положительным, либо отрицательным. Положительный результат говорит о том, что в организме человека обнаружены следы инфекции, причем именно в данный момент времени. ПЦР тестирование. Полимеразная цепная реакция — это технология, позволяющая выделить из двойной спирали ДНК участок с конкретным геном, размножить его и изучить. Госпитализированы в основном потому, что положительный ПЦР. положительный, IgM – положительный. Вы находитесь на поздней стадии заболевания или выздоровления.
Что такое ПЦР? О методе полимеразной цепной реакции
Может ли ПЦР-тест на COVID-19 показать положительный результат при простуде | Госпитализированы в основном потому, что положительный ПЦР. |
Диагностика коронавируса COVID-19 | «Положительный результат ПЦР-тестирования в абсолютном большинстве случаев говорит о наличии вируса на слизистой оболочке носоглотки и возможности его передачи окружающим, — говорит Татьяна Руженцова. |
Что такое ПЦР тест на коронавирус и как правильно сдавать мазок | Как работает ПЦР тест на коронавирус. ПЦР-тестирование (также известное как тестирование полимеразной цепной реакции) — это тип лабораторного исследования, который сообщает, есть ли у кого-то в настоящее время COVID-19. |
ПЦР диагностика - что это такое, когда назначается, расшифровка | Результат оценивается либо положительно, когда бактерия или вирус выявляются в исследуемом образце, либо отрицательно, что означает отсутствие инфекции в организме. Точность метода. |
Мясников рассказал, почему при положительном ПЦР-тесте человек не болен COVID | Положительный ПЦР означает только то, что Вы заразны для окружающих и выделяете вирус. |
Что выбрать: ПЦР-тест или тест на антитела к COVID-19?
Вариантов может быть несколько, в зависимости от подсчитанного количества: если иммуноглобулинов данного типа немного, то COVID-19 находится на начальном этапе развития; если количество зашкаливает, значит сейчас острая фаза. В это время человек все еще является разносчиком инфекции, даже если у него нет никаких симптомов; присутствие IgM в небольшом количестве в сочетании с IgG указывает на завершение болезни. Иммуноглобулин типа G производится в острой стадии и остается в крови после выздоровления, обеспечивая иммунитет длительное время. Если тест показал наличие антител к коронавирусу типа IgG, значит у вас уже есть иммунитет к данному заболеванию и вы не представляете опасности для окружающих. Небольшое количество иммуноглобулинов свидетельствует о том, что вы переболели недавно. Какой тест сдавать?
Оба варианта тестов являются эффективными, но в большинстве случаев мы рекомендуем делать тест на антитела, так как он более универсальный. Быстрее - Сейчас в лабораториях большие очереди по ПЦР-тестам и результатов можно ждать от 3 до 5 дней. По антитела результаты будут готово в течение 3-х дней. Доступность - ПЦР-тест стоит дороже, так как тест-системы более дорогие. ПЦР-тест необходим для того, чтобы выявить инфекцию на ранней стадии, до развития иммунного ответа.
Его рекомендуют делать в тех случаях, когда тест на антитела дал отрицательный или неоднозначный результат.
Подготовка к анализу зависит от того, какой биологический материал вы сдаете. Если кровь, то особо готовиться не надо. Для других материалов есть несложные правила — если их соблюдать, анализ будет точнее. Если вам назначили качественный ПЦР-анализ, имеет смысл сдавать его или в государственной лаборатории если обследование положено по ОМС , или в частной, где окажутся подходящие цены.
Если вам назначили количественный ПЦР-анализ, врач напишет в направлении не только название исследования, но и предпочтительный метод, которым нужно провести ПЦР-анализ.
Необходимо строго соблюдать правила сбора биоматериала и его хранения. Важно выбрать правильное время взятия биоматериала и выполнить правила подготовки к тесту. В частности, это касается и нового коронавируса, который присутствует в выделениях носоглотки и ротоглотки только в течение определенного времени, по истечении которого анализ окажется отрицательным. Кроме того, высокая чувствительность ПЦР может иногда превращаться из преимущества в недостаток.
Показания к проведению ПЦР-анализа ПЦР-тесты используются для: диагностики инфекционных заболеваний, вызванных вирусами, бактериями и грибами, в том числе для определения возбудителей ряда урогенитальных инфекций; определения патологических генетических нарушений; определения роста и развития раковых клеток. ПЦР тест также можно использовать для прямой диагностики наличия заболевания и мутаций в развивающемся эмбрионе. Например, впервые ПЦР была использована таким образом для диагностики серповидно-клеточной анемии путем обнаружения мутации одного гена. Как проводится ПЦР-анализ Метод полимеразно-цепной реакции постоянно развивается. Самым распространенным на сегодня является тест в реальном времени, с помощью которого можно определить исходное количество копий ДНК РНК.
ПЦР с вложенной парой праймеров гнездовая проводится в две стадии для снижения вероятности амплификации неспецифичных участков ДНК. Инвертированная ПЦР используется в случае, когда нужно выяснить природу неизвестных участков ДНК, окружающих известный. Это только часть методов ПЦР, количество которых постоянно пополняется новыми технологичными вариантами.
Мы разберем, какими методами он проводится, можно ли пройти его самостоятельно, как интерпретировать результат. Что такое ПЦР-тест? ПЦР-тест — это основной метод исследования биологических жидкостей на коронавирус. Он давно используется для выявления всевозможных инфекций в организме человека. ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Тест основан на лабораторном изучении фрагмента ДНК во взятом материале. Фрагмент многократно удваивают и наблюдают, повторяется ли в нем искомый участок.
Эксперимент показывает, есть ли коронавирус в организме человека. При этом определить его наличие можно даже до появления первых симптомов. Инкубационный период составляет до шести дней. За это время инфекция может поразить большое количество людей. Если вовремя сделать ПЦР-тест, пациент будет изолирован. Это предотвратит распространение вируса. Кому и как проводят ПЦР-тест на ковид? Подобные исследования проводят повсеместно с целью сдерживания опасной инфекции. В большинстве случаев это происходит добровольно, но иногда обязанность обусловлена требованиями закона. Сдать ПЦР-тесты должны все путешественники, прибывающие в Россию.
Причем условия одинаковы не для всех. Для иностранцев отрицательный результат теста — фактически пропуск в страну. Соотечественники же могут посетить лабораторию позднее. Сделать это должен: любой человек с признаками ОРВИ; член семьи пациента, у которого диагностирована коронавирусная инфекция; потенциальный контактный гражданин, который находился в общественных местах без маски или общался с больным; медработник, лечивший зараженного. ПЦР-тест проводится путем забора мазка из носоглотки. Сделать его можно в лаборатории или вызвав врача на дом. Реакцию запускают в лабораторных условиях.
Возможные причины ложноотрицательных результатов
- «Какого-то внятного ответа от врача я не получила»
- ПЦР-тесты: для чего нужен, как сдавать анализ, цена, можно ли верить результатам
- Какую информацию дает тест на антитела
- Ложноположительный ПЦР: Почему так бывает?
- Сколько можно болеть: почему даже спустя месяц ПЦР-тест на ковид остается положительным
Различие тестов на коронавирус
1. Как быстро будет готов результат ПЦР-теста? После того как у человека взяли мазок, у лаборатории есть 24 часа на доставку материала на исследование и ещё 24 часа – на проведение исследования и выдачу результата. У вас положительный результат теста на COVID-19. Положительный результат ПЦР-тестирования позволяет своевременно выявить заболевание, назначить нужное лечение и добиться изоляции пациента, что сохранит других людей от риска заражения. ПЦР расшифровывается как “полимеразная цепная реакция”. Такой метод диагностики направлен на обнаружение РНК коронавируса COVID-19.
Что делать при положительном тесте на коронавирус
Полимеразная цепная реакция — метод, позволяющий обнаружить конкретный генетический материал в образце. Суть полимеразной реакции. ПЦР положительный: что это значит.
ПЦР: метод, который слишком хорош
Полимеразная цепная реакция почти для каждого из нас стала обыденностью, даже если этот каждый никогда и слов таких не слышал. ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Данная реакция обеспечивает многократное воспроизводство определённых участков ДНК. Сделать ПЦР-диагностику в Москве Вы можете в лаборатории АО «Семейный доктор». Диагностика коронавируса (ПЦР). ПЦР — это полимеразная цепная реакция. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — метод молекулярной биологии. В результате известные фрагменты оказываются на обоих концах неизвестного участка, после чего можно проводить ПЦР как обычно.